利用侧流核酸试纸条快速检测非洲猪瘟病毒(7)
该结果证明,在实际样品的检测中,LNFAA能够准确的检测出ASFV,而不会与其他病毒出现交叉反应,导致假阳性的错误判断,这与OIE推荐的荧光定量PCR的结果一致。
1.ASFV的基因片段DNA;2~4.感染ASFV猪的血液DNA;5.感染CSFV猪的血液DNA;6~10.PRRSV、PCV1、PCV2、PRV、PPV的基因片段DNA;11.健康猪的血液DNA; African swine fever virus (ASFV) gene DNA; DNA from a blood sample of infected pigs with African swine fever virus (ASFV); DNA from a blood sample of infected pigs with Classical swine fever virus (CSFV); gene of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), Porcine circovirus 1 (PCV1), Porcine circovirus 2 (PCV2), Pseudorabies virus (PRV), Porcine parvovirus virus (PPV); DNA from a blood sample of uninfected pigs; ddH2O图4 荧光定量PCR和侧流核酸测定试纸条对实际样品的检测Fig.4 Detection of real samples by real-time PCR and LFNAA
3 结 论
为了满足资源有限的实验室对ASFV的检测需求,该研究开发了一种简单、快速、低成本的检测技术,可以用肉眼观察检测结果。
1)将胶体金试纸条技术与传统PCR技术结合,能够大大简化传统PCR扩增产物的分析技术。与常见的诊断试纸条相比,该测流核酸测定试纸条采用独特的尾引物,能够消除复杂的半抗原标记的需要,无需昂贵的抗体,即可在检测线上发生红色反应,用肉眼观察目标产物的存在。
2)将LFNAA体系应用于实际样品的检测,结果表明,该试纸条能够特异性的鉴定出非洲猪瘟ASFV的样品,灵敏度能达到103copies/μL,与中国动物疫病预防控制中心认可的ASFV检测试剂盒的灵敏度相一致。
3)该技术能够在2 h内肉眼鉴定出结果,且操作简单,非常适合非专业人员操作,完全能够满足资源相对匮乏的实验室的低成本检测。
文章来源:《四川动物》 网址: http://www.scdwzzs.cn/qikandaodu/2021/0728/1606.html
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